Resumen
El desarrollo rápido de métodos de diagnóstico para la detección del síndrome respiratorio agudo severo coronavirus 2 (SARS-CoV-2) ha sido fundamental para realizar pruebas de diagnóstico molecular eficaces y confiables. La mayor parte de los métodos basados en RT-PCR en tiempo real fueron reconocidos como protocolos de referencia desde el inicio de la pandemia. Tres fueron los genes (E, N y RdRp) identificados para hacer frente al coronavirus (COVID-19), recomendando el uso del PCR dirigido al gen E, seguido de la confirmación con el gen RdRp.
Desde ese entonces, una diversidad de kits diagnostico fueron comercializados para la detección SARS COV 2, sin embargo, estudios realizados de RT-PCR dirigidos a los genes E y RdRp, mostraron umbrales significativamente diferentes obteniendo, además, resultados positivos para E y
negativos para RdRp, motivando esto, a buscar métodos más resolutivos. La electroforesis capilar es una herramienta de separación de ácidos nucleicos, que presenta una versatilidad de separación altamente resolutiva. La misma puede realizarse en unos minutos utilizando pequeñas cantidades de muestra, con una alta reproducibilidad, y con un error estándar relativo de tiempo de migración menor
a 0,5%.
El Laboratorio de Genética Molecular del Instituto SELADIS tiene toda la capacidad técnica y científica instalada para el desarrollo de pruebas de RT-PCR en tiempo real y análisis de fragmentos por electroforesis capilar en su plataforma automatizada. En el presente trabajo pretendemos desarrollary validar una metodología de diagnóstico robusta y altamente resolutiva útil para confirmar resultados
no conformes, a través de la electroforesis capilar.
Objetivo General
Objetivos específicos
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Identificar pacientes cuyos resultados presenten curvas de amplificación PCR cercanas al umbral límite de positividad en la prueba RT - qPCR.
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Optimizar la prueba de electroforesis capilar para la identificación SARS COV 2.
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Validar la prueba de electroforesis capilar para el diagnostico molecular de COVID 19.